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造因干细胞和祖细胞的体外扩增和临床应用
造血的分子谓控、G—CSF的临床应用、核事故的造血损伤过程等作了介绍会议得到许多生物技术公司的支持，他们在会议中克分显示了应用研究实力,[link widoczny dla zalogowanych]，对血液学实验研究的方向有很大影响。GeaetJcs公司赞助的有关IL一11的研究报告，对IL—n的分子生物学及临床应用作了详细介绍，IL—n的升血小板功能和对造血祖细胞及对中性粒细胞和单榜细胞的作用均有临床应用前景。Cellpro公司赞助了有关造血和免疫治疗的研究报告研究内容方面，最突出的是造血干／祖细胞的分离、体外扩增和移植借助干／祖细胞表达CD。一膜抗原的特点．用CD单克隆抗体从骨髓、外周血或脐血中分离CD细胞，用于白血病和实体瘤的辅助治疗．乃至治疗自身免疫病和遗传病，显示了广阔的应用前景许多生物技术公司推出丁有效分离高纯度CD“细胞群的装置,[link widoczny dla zalogowanych]，如Isalex磁珠细胞分离体系和ACSD细胞筛选装置均可获得纯度9o以上的CD。一细胞,[link widoczny dla zalogowanych]，分离量过到临床应用需要随着分离技术的改进和完善，从外周血中获得CD细胞要比从骨髓中获得更加容易实箍。为动员更多干／租细胞进血流，英国weever等比较了GCSF和GCSF联合干细胞因子的作用，对48例卵巢癌患者的研究结果表明G—CSF与干细胞因子联台应用时，外周血中c一CD一细胞明显增多．具有启动长期培养能力的干细胞比单用G—CSF组增加了5．8倍。有关脐血的应用研究很多结果表明脐血中的怍者单位3000~0天津，中国医学科学航、中国和医科学血液学矸：CD“一细胞与骨髓中的CDt～细胞比倒近似．而且脐血中的CDs一CD一干细胞比倒更高。这种CD。CDs细胞没有淋巴细胞和髓细胞的分子标记，是分化潜力很高的造血干细胞但脐血量有限，根据德国和美国血站联合收集的871个脐血标本分析，平均有核细胞古量为(9土5)×l0，而用于于细胞移植至少要每公平体重输入1×10脐血有棱细胞，因此对于50kg体重的受体来说只能7O需要，更何况许多成年人体重超过50kg，所以从脐血CD细胞在体外扩增的研究颇受重视。从脐血分离的CDCD。一细胞与骨髓中的CD。CD。s一细胞～样是原始的千细胞，94处于G。／GL期。其中的G=期干细胞对细胞因子的刺擞不敏感，生存条件与骨髓基质有关，而进凡增殖周期的干细胞或祖细胞却绝对依赖细胞因子Keller等分析了1s个造血生长固子对干／祖细胞的怍用，发现干细胞因子、FIT一3配体和G—CSF等能支持干细胞存恬I而IL一6、IL一11和IL1等则直接刺激祖细胞增殖分化iIL一3和GMCSF也刺激增殖分化为主．支持干细瞻存活的作用不明显。因此对于收集的CDCD。一细胞,[link widoczny dla zalogowanych]，在体外的扩增配方应因使用目的不同而各异。用于骨髓重建需要保存细胞的丹化潜力和适当地扩增．宜选用有支持能力的细胞因子配台少量刺激因子，甚至加抑制因子TGF一0，培养时间短用于补充受损伤的祖细胞和分化细胞则宜增加刺激固子，甚至诱导单向分化。例如Ha~san等报道的35个脐血CD细胞的扩增结果，采用干细胞因子配合IL一3、lLI1和GM—CSF，培养咒小时能使CFU—GM扩增7倍，pre—CFUs扩增3O倍．适于骨髓移植。Seheding等则用IL一1、IL一3、IL一6、Epo、G—CSF等配合干细胞因子培养CD。细胞，培养2周后细胞总数扩增了117土26倍，以分化的幼稚细胞为主，适于强化疗昕致的血细胞减少患者。根据应用需要，有人单用PLXY321(IL一3和GMCSF的融台蛋白)，或在配方中加入Tpo促巨棱细胞生长,[link widoczny dla zalogowanych]。可见细胞因子组合及培养条件是干／祖细胞扩增的研究热点；(收蒋I99800(校对：董文革)
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