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酶联免疫吸附试验检测正常足月儿脐血中粒细胞集落刺激因子含量
37／50例脐血清阳性(74)，(ELIsA)检测试剂盒测定100例正常足月儿(5O例脐34／50例脐血浆阳性(6，总阳性率为71。测定的血清和50例脐血浆)脐血中G-CSF阳性率及其中5050例阳性脐血中G―CsF含量为0．14d：0．1lvg／ml例阳性脐血中G-CSF含量(0．04～O．6O帔／m1)。材料和方法讨论1脐血来源和翻备脐血标本来源于我院产科和北G―CSF是由单核细胞、内皮细胞及成纤维细胞产京市妇产医院出生的正常足月儿剪断脐带后，在胎盘生．分子量为19600。其主要生物活性是刺激粒细胞克未娩出前将来自胎盘的脐血收集在10ml玻璃试管内，隆生长，并激活成熟的粒细胞．增强中性粒细胞通过抗4℃冰箱保存，一般不超过48小时。用普通离心机体依穗细胞介导的细胞毒(ADCC)途径杀伤肿瘤细胞。2000r／min离心15分钟，分离脐血清或用复方枸辣酸近年来国外用酵联反应法及敲射免疫法等测定正常足钠(ACD)保养藏预先加入试管中．其浓度为25．2000月儿脐血中各种遣血因子，测定的已知造血因子中尤r／min离心15分钟，分离脐血浆。以G-CSF为高[国外医学·输血盈血藏掌分爵．坤93．16：2ELISA法811]．Laver等口Pe~iatr．1990，116：627]用NFS60小鼠细2．1用G-CSFELISA试剂盒检测G―CSF。本试剂盒胞株做靶细胞，用生物学方法测得正常足月儿脐血浆是选用两种G―CSF单克隆抗体，其中一种作为固相抗中G-CSF比正常成人血浆中G-CSF高16倍左右,[link widoczny dla zalogowanych]。我体包被酵标扳，另一种用酵标记作为示踪剂．建立起来们用G-CSFELISA检测试剂盒测定的5o倒正常足月的G-CSF双抗体夹心ELISA一步检测法。G―CsF儿脐血清(浆)中G―CsF含量比正常人血浆中G―CsFELISA检测试剂盒系北京协和医院诊断试剂厂生产。含量高1O倍以上(正常人血浆中G-CSF含量15ng／ml2．2测定方法见文献[中国医学科学院学报．1994,[link widoczny dla zalogowanych]，15，以下),[link widoczny dla zalogowanych]。37o]。在脐血中检测G-CSF的阳性率及含量高低可受2．3结果判断t在酵标仪上，波长450．m处测(吸光一些因素的影响：①十体差异。②血稀释，如有些产妇度，曾称光密度0D)值。试荆空白谓零,[link widoczny dla zalogowanych]，读出各孔A在分娩前恹大量水或静脉输入液体等。③收集脐血后值。按公式计算：未及时敲入4X3冰箱内使活性下降。④脐血浆的阳性率…一样品A值略低于脐血清可能与加入ACD保养藏使标本稀释有…一阴性甭嗫千两礓关。从测定的结果可看出，正常足月儿脐血中G~CSFS／N>12·I判断为阳性，反之为阴性。含量是非常高的。因此在有条件的地方，可以把被丢弃4本试剂盒的灵敏度可测到15ng,／ml的脐血收集起来，在无菌条件下分高脐血浆，采用临床2·5脐血中G―CSF含量测定静昧输注,[link widoczny dla zalogowanych]，可以用于某些血液病(如自血病、恶性肿瘤2-5·1G-CSF标准品系采用日本蜞一公司(重组G一大剂量化疗或放疗后的骨髓抑翻、急性再生障碍性贫cSF)为标准品·含量5O~g／mI·血、骨髓增生异常练合征、粒细胞碱步症等)和某些非2-5-2检测方法；将标准品稀释成不同的浓度(0-5，血液病性重症感染性痰病等。0．25，0．125，0-05，0025，m1)按血清检测方法测定·(收穑，19950103謦回．19950605)读取A值，在半对数坐标纸上翻作标准曲线。通过查曲(授对：_爵光)线计算出标本含量，并计算出平均值和标准差。作者单位：i00044北京医科大学人民医院
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